生物顯微鏡-形態(tài)學(xué)測(cè)量指標(biāo)與方法

生物顯微鏡-形態(tài)學(xué)測(cè)量指標(biāo)與方法

1．灰度（sreylevel＞：指圖像各種顏色的深淺程度。目前的圖像分析儀可將灰度分為256級(jí)，如免疫組織化學(xué)標(biāo)本的生物顯微鏡顯微圖像上反應(yīng)產(chǎn)物的染色深淺即可用灰度來表示，能將一張標(biāo)本上不同染色深度區(qū)分成為256級(jí)，這是肉眼所不及的。因此，某些實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，如果用光學(xué)顯微鏡作一般的觀察，似乎實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組無明顯差異，而用顯微圖像分析系統(tǒng)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，則可反映出顯著性差異，這說明僅僅用顯微鏡觀察是不夠的。

由于免疫反應(yīng)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)不一定是均勻分布的，在同一個(gè)細(xì)胞中就可產(chǎn)生各種灰度，這種情況如何進(jìn)行比較?有兩種方法可供選用：一種方法是測(cè)每個(gè)細(xì)胞的平均灰度，另一種方法是在反應(yīng)產(chǎn)物不均勻的細(xì)胞中可用每一種灰度所占的百分率來表示。例如要觀察1000個(gè)細(xì)胞，在這些細(xì)胞中各種灰度所占的百分率可測(cè)出，并作出曲線，或用其他統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理，進(jìn)行比較。

有些生物顯微鏡顯微圖像分析系統(tǒng)中帶有光密度計(jì)組件，光密度計(jì)能將掃描器視頻信號(hào)變換成對(duì)應(yīng)數(shù)值，然后數(shù)值化，就能用光密度單位來校正。因此，光密度計(jì)把被測(cè)物的積分光密度作為主要輸出，所謂積分光密度即各個(gè)單獨(dú)探測(cè)的像素密度分布的總和。因?yàn)槿菀椎玫奖粶y(cè)物的面積，也就很容易求出平均密度。光密度在組織化學(xué)反應(yīng)的定量領(lǐng)域內(nèi)極為有用。灰度是—•種相對(duì)值，而光密度是值。在文獻(xiàn)中光密度常用oD（opticaldensity）表示。

2．長(zhǎng)度：形狀不規(guī)則的線形組織結(jié)構(gòu)，一般方法很難計(jì)算出其長(zhǎng)度，如組織中的毛細(xì)血管、神經(jīng)纖維、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中的各種膜性結(jié)構(gòu)等，以往常用排列稀疏或稠密等詞描述，顯微圖像分析系統(tǒng)則可測(cè)出各種圖像的周界線長(zhǎng)度。

3．面積：無論是在光鏡或電鏡下觀察的標(biāo)本，都要涉及有關(guān)標(biāo)本中某些結(jié)構(gòu)的面積問題。即使是極不規(guī)則的結(jié)構(gòu)，用生物顯微鏡顯微圖像分析系統(tǒng)也能算出其面積。在一定的放大倍數(shù)下，可以測(cè)出每2P“中含多少像素，因此畫出待測(cè)結(jié)構(gòu)的輪廓，在所勾畫的范圍內(nèi)含多少像素是立即可顯示出來的，這樣，很快可算出面積的數(shù)值。

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